一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?span>

本研究利用固相萃取法作為樣品的前處理方法，HPLC法作為檢測(cè)手段。該方法可簡(jiǎn)化樣品的前處理過(guò)程，節(jié)省有機(jī)溶劑的使用，操作簡(jiǎn)便。

二、實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)物

依諾沙星(CAS：74011-58-8 ),恩諾沙星(CAS：93106-60-6),培氟沙星(CAS：70458-95-6 )，丹諾沙星(CAS：119478-55-6)

三、應(yīng)用范圍

本方法適用于食品中喹諾酮的HPLC檢測(cè)及確證。

四、參考標(biāo)準(zhǔn)

    推薦性國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《GBT 21312-2007 動(dòng)物源性食品中14種喹諾酮藥物殘留檢測(cè)方法》

五、實(shí)驗(yàn)材料

   SimplyGreen HLB  固相萃取柱200mg/6mL。

六、實(shí)驗(yàn)方法

   1、樣品提取

    稱取均質(zhì)試樣5.0ｇ試樣（精確至0.001ｇ）于50mL離心管中，加入20ｍＬEDTA Mellvaine緩沖溶液，1000r/min渦旋混合1min，超聲提取10min，10000r/min離心5min（溫度低于5度），提取三次合并上清液。

   2、SPE柱活化

   凈化前用6mL甲醇、6mL水活化。

   3、上樣和洗脫

將提取液以2mL/min的速度過(guò)柱，棄去濾液，用2mL5%甲醇水溶液淋洗，棄去淋洗液，將小柱抽干，再用6mL甲醇洗脫并收集洗脫液。

   4、重新溶解

    50℃緩慢氮?dú)饬鳁l件下吹至近干，用1mL0.2%甲酸水溶液溶解。1000r/min渦旋混合1min，經(jīng)0.45um有機(jī)濾膜過(guò)濾后用于上機(jī)測(cè)定。

   5、HPLC條件

色譜柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6*250mm)

流動(dòng)相：A乙腈     B[0.1%甲酸的水溶液] 梯度洗脫

表1 梯度洗脫條件

流速：1mL/min

柱溫：室溫

進(jìn)樣體積:20μl

七、實(shí)驗(yàn)結(jié)果

1、6ppb牛奶基質(zhì)中喹諾酮的添加回收結(jié)果

表2 6ppb牛奶基質(zhì)中喹諾酮的添加回收結(jié)果

2、    空白樣品添加喹諾酮?dú)埩粑锷V圖